产品概述
利用荧光探针 DCFH-DA 检测细胞内活性氧水平，无荧光的 DCFH 被胞内活性氧氧化为有荧光的 DCF，Ex/Em=488nm/525nm，可用 FITC 参数检测；配套 ROS Control 阳性刺激试剂。
核心特点
以下要点取自产品技术资料与检测报告原文。
- 基于 DCFH-DA 荧光探针：自由穿过细胞膜后被酯酶水解为 DCFH，被活性氧氧化生成有荧光的 DCF
- DCF 荧光光谱与 FITC 非常相似，Ex/Em=488nm/525nm，可用 FITC 参数设置检测
- 配套活性氧阳性刺激试剂 ROS Control，按 1:1000 比例使用，通常刺激后 20~30min 可见显著活性氧水平升高
- 支持激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪及流式细胞仪多种检测
- 适用于贴壁细胞（原位装载）及悬浮/消化收集细胞（收集后装载）
技术规格
以下参数取自产品数据库，货号/规格采用等宽字体便于扫视对比。
- 产品货号
- ACSOD1-100
- 子品牌
- AngenoCell™
- 子分类
- 细胞检测
- 包装规格
- 48T
- 储存条件
- -20℃避光储存；冰袋运输；初次使用可分装保存，尽量避免反复冻融
保质期 1 年
试剂盒组分
产品随附以下组分，规格以实际说明书为准。
- 10 mM DCFH-DA100 μL
- 活性氧阳性刺激试剂 ROS Control1.0 mL
操作流程
以下步骤取自产品说明书，实际操作以纸质说明书为准。
用 PBS 或 HBSS 按 1:1000 稀释 10mM DCFH-DA，制成终浓度 10μM 的工作液
原位装载（贴壁细胞）：细胞汇合度 50~70%，PBS 清洗 2 次后加入 DCFH-DA 工作液充分盖住细胞（六孔板每孔不少于 1mL），37℃ 孵育 20min，用不含血清培养基洗涤 3 次去除未进入细胞的探针
收集后装载（悬浮/消化细胞）：细胞约 1×10⁶ 个/mL 加入 DCFH-DA 工作液混匀，37℃ 孵育 20min（每 3-5min 颠倒混匀），200-300×g 离心 3min 后用不含血清培养基洗涤 3 次
阳性对照：ROS Control 按 1:1000 加入装载好探针的细胞（如 1mL 加 1μL），通常 20-30min 内可见显著活性氧升高
阴性对照：确认未染色细胞自发荧光、无细胞染料缓冲液本底及未处理加载细胞的本底荧光
检测：激光共聚焦显微镜直接观察，或荧光分光光度计/荧光酶标仪/流式细胞仪检测；参数 488nm 激发、525nm 发射，可用 FITC 参数检测 DCF
应用领域
该产品适用于以下科研场景。
- 细胞内活性氧(ROS)水平检测
- 氧化应激研究
- 药物/化合物诱导活性氧评价
- ROS
- 活性氧
- DCFH-DA
- 氧化应激
- 荧光探针
- DCF
- FITC
- 流式细胞仪
注意事项
使用前请阅读以下要点（含生物安全、储运与售后说明）。
- 本产品需避光保存，避免影响实验结果
- 仅在阳性对照孔中加入阳性刺激试剂，其余孔不必加入
- 探针装载后须洗净残余未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高
- 阳性刺激试剂通常按 1:1000 使用；若 30min 内观察不到活性氧升高可延长诱导时间或提高阳性对照浓度，升高过快则缩短时间或降低浓度
- 尽量缩短探针装载后到测定所用的时间（刺激时间除外）以减少误差
- 为避免淬灭效应，应检查所加药物/化合物的吸收光谱是否与探针激发和发射光谱重叠
- 阴性对照荧光偏强时可按 1:2000-1:5000 稀释 DCFH-DA（终浓度 2-5μM），装载时间可在 15-60min 内调整
合规提示：本产品为科研试剂，仅供科学研究使用，不用于临床诊断或治疗。涉及干细胞、细胞治疗等可能向临床转化的应用时，使用方需自行评估并满足相关监管框架要求。吉诺生物可提供 GMP 级细胞制备 CRO+CDMO 服务，详询干细胞服务页面。