Q: 细胞冻存液 AC-CRYO-50 在 -80℃ 保存多久后必须转入液氮？

建议 -80℃ 保存不超过 2 周，最长不超过 1 个月。长期保存务必转入液氮（-196℃）。-80℃ 长期保存会显著降低复苏率（每月衰减 10-15%）。

Q: AS-RNA-EX-50 提取的 RNA 完整性差（28S/18S < 1.5）

RNA 完整性差的原因：① 样本采集后未立即冻存；② 操作过程未戴口罩，唾液中 RNase 污染；③ 移液器吸头未使用 RNase-free。建议：使用 -80℃ 立即冻存的新鲜样本，全程戴双层手套和口罩，所有耗材使用 DEPC 处理或 RNase-free 认证产品。

Q: siRNA AS-siRNA-PRO-100 敲低效率仅 50% 左右

可能原因：① siRNA 设计未避开 UTR 区或剪切位点；② 转染时血清抑制了脂质体活性（应使用 Opti-MEM 或无血清培养基）；③ 检测时间点偏早（建议 mRNA 48h，蛋白 72h）。如已优化仍 <70%，建议尝试三个不同位点的 siRNA 池。

Q: qPCR 扩增曲线异常（无 S 形 / 平台期偏低）

无 S 形：通常是引物浓度过低或模板量不足。建议：① 引物终浓度 200-400 nM；② cDNA 至少 20 ng/反应。平台期偏低：可能是 ROX 校正失败（DyeFreeMark）或扩增效率 <90%。建议绘制标准曲线确认 E=90-110%。

Question 1

MSC 用 AC-MSC-CM-500 培养基扩增到 P5 后形态变差，如何排查？

Accepted Answer

建议从三方面排查：① 起始 P0-P2 代次细胞质量（推荐使用 P3 之前细胞建库）；② 培养皿表面处理（建议用 0.1% 明胶预处理或 Cell+ 处理皿）；③ 传代密度（推荐 5×10³/cm²，避免过低密度引起衰老）。如仍有问题，可申请技术工程师远程诊断。

Question 2

FBS 解冻后是否需要 56℃ 灭活？

Accepted Answer

AC-FBS-100 已经过 γ 射线辐照 + 0.1 μm 三级过滤，原则上无需灭活。仅在以下场景建议灭活：① 干细胞培养（避免补体激活）；② 免疫细胞共培养。灭活方法：56℃ 水浴 30 分钟，每 5 分钟轻摇一次。

Question 3

转染试剂 AC-TF-PRO-1 在悬浮细胞中效率低，怎么办？

Accepted Answer

悬浮细胞建议：① 增加试剂用量至贴壁配方的 1.5-2 倍；② 采用 25℃ 室温孵育复合物 15 分钟（而非 RT 5 分钟）；③ 转染后 4-6 小时换液降低毒性。如效率仍 <50%，可考虑切换至我司 AAV 病毒包装方案。

Question 4

细胞冻存液 AC-CRYO-50 在 -80℃ 保存多久后必须转入液氮？

Accepted Answer

建议 -80℃ 保存不超过 2 周，最长不超过 1 个月。长期保存务必转入液氮（-196℃）。-80℃ 长期保存会显著降低复苏率（每月衰减 10-15%）。

Question 5

质粒提取试剂盒 AS-PLAS-MAXI-25 OD260/280 异常（<1.7 或 >2.0）怎么办？

Accepted Answer

OD260/280 < 1.7 通常提示蛋白污染（异丙醇沉淀不充分）；> 2.0 提示 RNA 污染。处理方法：① 蛋白污染：增加洗脱体积重新过柱；② RNA 污染：洗脱前增加 RNase A 处理（37℃ 30 分钟）。如反复出现，建议联系技术支持核查批号。

Question 6

AS-RNA-EX-50 提取的 RNA 完整性差（28S/18S < 1.5）

Accepted Answer

RNA 完整性差的原因：① 样本采集后未立即冻存；② 操作过程未戴口罩，唾液中 RNase 污染；③ 移液器吸头未使用 RNase-free。建议：使用 -80℃ 立即冻存的新鲜样本，全程戴双层手套和口罩，所有耗材使用 DEPC 处理或 RNase-free 认证产品。

Question 7

siRNA AS-siRNA-PRO-100 敲低效率仅 50% 左右

Accepted Answer

可能原因：① siRNA 设计未避开 UTR 区或剪切位点；② 转染时血清抑制了脂质体活性（应使用 Opti-MEM 或无血清培养基）；③ 检测时间点偏早（建议 mRNA 48h，蛋白 72h）。如已优化仍 <70%，建议尝试三个不同位点的 siRNA 池。

Question 8

qPCR 扩增曲线异常（无 S 形 / 平台期偏低）

Accepted Answer

无 S 形：通常是引物浓度过低或模板量不足。建议：① 引物终浓度 200-400 nM；② cDNA 至少 20 ng/反应。平台期偏低：可能是 ROX 校正失败（DyeFreeMark）或扩增效率 <90%。建议绘制标准曲线确认 E=90-110%。

Question 9

AA-PCR-HF-200 高保真酶扩增长片段（>10 kb）失败

Accepted Answer

长片段扩增建议：① 增加延伸时间至 30 sec/kb；② 退火温度比 Tm 低 3-5℃；③ Mg²⁺ 浓度 1.5-2.0 mM；④ 使用高质量基因组 DNA（OD260/280 = 1.8-2.0）。如仍失败，可分段扩增后再 Gibson 拼接。

Question 10

AA-RT-qPCR-100 一步法 RT-qPCR 出现非特异条带

Accepted Answer

可能原因：① 引物在 RT 步骤错误起始；② 模板基因组 DNA 残留。建议：① 设计跨外显子引物；② RNA 提取后用 DNase I 充分消化；③ 加入 No-RT 对照排除 gDNA 污染。

Question 11

WB 用 AP-WB-BLK-250 封闭后背景仍偏高

Accepted Answer

背景偏高排查：① 封闭时间不足（建议 RT 1h 或 4℃ 过夜）；② 一抗稀释液浓度过高；③ 二抗交叉反应（先做无一抗对照实验）；④ ECL 试剂过期。建议先排查二抗，多数高背景源于二抗非特异结合。

Question 12

AP-AB-DIL-100 抗体稀释液重复使用次数

Accepted Answer

推荐 4℃ 保存可重复使用 3 次，2 周内有效。每次使用前观察是否浑浊（提示污染），抗体活性会随次数小幅下降，关键实验建议使用新鲜稀释。

Question 13

AP-MYC-DET-50 支原体快检阳性后如何处理？

Accepted Answer

确认阳性后：① 立即弃用所有相关培养基与耗材；② 实验室全面酒精消毒；③ 使用支原体清除试剂（如 AC-MYC-CL-10）治疗有价值的细胞 14 天疗程；④ 治疗后必须用 AP-MYC-DET-50 PCR 法二次确认阴性方可恢复使用。建议每月例行检测。

Question 14

产品到货后发现冷链温度异常如何处理？

Accepted Answer

请第一时间：① 拍摄温度记录卡照片；② 联系吉诺客服 0513-86326829；③ 暂不开封产品。我司将在 24h 内响应，根据温度记录评估产品有效性，如确认失效将免费补发。

Question 15

试用装申请被拒原因？

Accepted Answer

常见原因：① 使用了非单位邮箱（如 QQ/163/Gmail）；② 单位类型不在覆盖范围内；③ 同一单位同款产品 12 个月内已申请过。如对审核结果有异议，可邮件 support@geno-bio.com 申诉，提供单位资质证明。

Question 16

如何获取批量采购报价？

Accepted Answer

≥10 万元订单可享专属价格。请通过 /contact 提交商务合作表单，或直接邮件 sales@geno-bio.com，注明：① 采购清单（SKU + 数量）；② 采购单位；③ 采购方式（直采 / 招标）。商务团队 2 个工作日内响应。

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