产品概述
采用 JC-1 阳离子脂质荧光染料检测线粒体跨膜电位,通过红色荧光到绿色荧光的转变检测线粒体膜电位下降,作为细胞凋亡早期的检测指标;试剂盒配套 CCCP 阳性对照。
核心特点
以下要点取自产品技术资料与检测报告原文。
- JC-1 在线粒体膜电位高时聚集形成聚合物发红色荧光,膜电位低时以单体存在发绿色荧光
- 通过红/绿荧光转变检测线粒体膜电位下降,作为细胞凋亡早期标志性事件
- 配套 CCCP(50 mM)线粒体电子传递链抑制剂作阳性对照
- 支持荧光显微镜、荧光酶标仪及流式细胞仪等多种检测方式
- 适用于贴壁细胞、悬浮细胞及纯化后的线粒体
技术规格
以下参数取自产品数据库,货号/规格采用等宽字体便于扫视对比。
- 产品货号
- ACJC1-10
- 子品牌
- AngenoCell™
- 子分类
- 细胞检测
- 包装规格
- 10T
- 储存条件
- -20℃避光保存;尽量避免反复冻融
有效期 1 年
试剂盒组分
产品随附以下组分,规格以实际说明书为准。
- JC-120T 装 100ul / 100T 装 500ul
- 10× Buffer A20T 装 5ml / 100T 装 25ml
- CCCP(50 mM)20T 装 10ul / 100T 装 50ul
操作流程
以下步骤取自产品说明书,实际操作以纸质说明书为准。
诱导细胞凋亡,同时设立阴性对照组和阳性对照组
阳性对照:按培养基量加入 50mM CCCP(如终浓度 50μM 即 1mL 培养基加 1μL),37℃ 孵育 20min
配制 JC-1 工作液:取 10μL 100×JC-1 染色液加入 890μL 灭菌 ddH₂O 涡旋混匀,再加 100μL 10×Buffer A 涡旋混匀得 1×JC-1 染色液(细胞悬液每 1-5×10⁵ 个细胞需 500μL,6 孔板每孔 1mL)
配制 1×Buffer A:100μL 10×Buffer A 加 900μL 灭菌超纯水,混匀预热至 37℃
贴壁细胞:PBS 洗涤后加 1mL 培养液,再加 1mL JC-1 工作液混匀,37℃ 孵育 20min;用预冷 Buffer A 洗涤两次,加培养液后荧光显微镜或荧光酶标仪检测
悬浮细胞:5×10⁵ 细胞重悬于 0.5mL 培养液,加 0.5mL JC-1 工作液混匀,37℃ 孵育 20min;1000rpm 离心 5min,预冷 Buffer A 重悬洗涤两次后荧光显微镜或流式检测
结果分析:荧光酶标仪红色荧光 Ex/Em 550/600nm、绿色荧光 Ex/Em 485/535nm;计算红/绿荧光比值,凋亡或坏死细胞中比值降低
应用领域
该产品适用于以下科研场景。
- 细胞凋亡早期检测
- 线粒体膜电位检测
- 凋亡诱导剂效果评价
- JC-1
- 细胞凋亡
- 线粒体膜电位
- CCCP
- 流式细胞仪
- 荧光检测
- 凋亡早期
- 膜电位指示剂
注意事项
使用前请阅读以下要点(含生物安全、储运与售后说明)。
- 微量试剂取用前请离心集液
- JC-1 避光保存及使用
- 不同细胞适用的染料浓度与孵育时间存在差异,建议预实验确定最优条件
- 细胞固定后可能导致荧光淬灭,请不要固定样品
- 对 pH 变化过于敏感的细胞建议延长观测时间
- 建议每次检测均使用经凋亡诱导处理的细胞作对照,进行荧光补偿调节
- CCCP 为线粒体电子传递链抑制剂,有毒,请小心防护
- JC-1 低温会凝固粘壁,可 20-25℃ 水浴温育至全部融解后使用
- JC-1 染色并洗涤完成后尽量在 30min 内完成后续检测,检测前需冰浴保存
合规提示:本产品为科研试剂,仅供科学研究使用,不用于临床诊断或治疗。涉及干细胞、细胞治疗等可能向临床转化的应用时,使用方需自行评估并满足相关监管框架要求。吉诺生物可提供 GMP 级细胞制备 CRO+CDMO 服务,详询干细胞服务页面。